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ER2566化学感受态细胞图片
产品货号:
MQ0051
中文名称:
ER2566化学感受态细胞
英文名称:
ER2566 Chemically Competent Cell
产品规格:
10×100μl|50×100μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
ER2566感受态细胞为lon和ompT蛋白酶缺陷菌株。
膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
ER2566感受态细胞采用特殊化学试剂制作,可用于DNA的化学转化,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F-λ-fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sμlA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS)endA1 [dcm]
操作说明:
1.取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
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